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  • 20178-10
    高质量RNA提取条件之二

    1.选择好的RNA分离方法现有众多的RNA分离方法也许令人难以取舍。目前简单也是安全的方法是柱式分离,如RNApure因为操作简单,时间短,纯度高而受到大家的喜爱,RNApure不需要DNA酶消化DNA,节省了时间,避免RNA的降解,从而提高了产量;相对非柱式分离(如TRIZOL),去除蛋白及其他杂质干净,提高了纯度,对于细胞、组织、一般植物均非常适合。植物RNA的提取比较难抉择,植物RNA提取受酚、多糖、蛋白杂质、次生代谢物含量的影响,一般用TRIZOL提取纯度不高,而且很...

  • 20178-9
    高质量RNA提取条件之一

    1.迅速灭活内源的RNA酶,以防止RNA降解。以下3个方法均可有效使内源RNA酶失活:1)用含离液(如胍盐)的细胞裂解液收获样品,并立即匀浆。2)用液氮瞬间冻结样品。值得特别注意的是:组织块足够小,在浸入液氮的瞬间就能冻结,以瞬间令RNA酶失活。3)立即将样品置于RNAfixer无液氮RNA样品储存液中。它是一种水相、无毒的收集试剂,能立即稳定并保护完整、未冻结的组织和细胞样品中的RNA。关键要点是组织样品切片要够薄(),这样RNAfixer才能在RNase破坏RNA之前迅速...

  • 20178-8
    Elisa试剂盒试验过程中需要特别注意的细节

    Elisa试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA)、已知浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中的浓度呈比例关系。Elisa试剂盒试验过程中需要特别注意的细节1、试剂准备:试剂都在使用前达到室温,使用后请立即按照说明书要求保存。实验操作中使用一次性吸头,避免交叉污染;2.加样:加样时,...

  • 20178-3
    血清的保存方式

    血清的保存应该注意以下几点:(1)生物学实验中需要长期保存的血清储存于-20℃-70℃低温冰箱中。4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月。由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,预留体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。(2)热灭活是指56℃,30分钟加热已解冻的血清。生物学实验中加热过程中须规则摇晃均匀。此热处理的目的是使血清中的补体成分(complement)灭活。除非,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增多,而且还会影响血清的质量。补体...

  • 20177-27
    结缔组织类细胞培养

    一、成纤维细胞培养用人或动物胚体为好;动物可用小鼠或鸡胚,去头和内脏,剪成小碎块后,用胰蛋白酶消化法培养;如为人胚,可取皮肤培养。幼儿包皮是培养成纤维细胞的很好对象。二、巨噬细胞培养1.实验前三天,向每只小鼠腹腔内注入无菌硫羟乙酸肉汤1ml(勿注入肠内)。2.引颈杀死动物,手提鼠尾将全鼠浸入70%酒精中3~5秒。3.置动物于解剖台上,用针头固定四肢,双手持镊撕开皮肤拉向两侧,暴露出腹膜,但勿伤及腹膜壁。4.再用70%酒精擦洗腹膜壁后,用注射器吸10mlEagle液注入腹腔中,...

  • 20177-26
    动物交际实验

    一、动物交际实验原理:动物交际实验利用小鼠熟悉了环境后,检测小鼠靠近位于实验箱中装有另一只陌生小鼠的金属笼的时间,来判断小鼠的社交能力。二、动物交际实验参数指标:活动距离、运动速度、测试时间区域指标各区域运动路程、逗留时间、静止时间各区域(左区域、右边区域、中央区域)次进入时间、进入次数长访问时间、短访问时间、进入前总路程、次离开时间特色指标束缚鼠间的接触次数、接触持续时间、次接触时间、接近时间与束缚鼠间距离、与束缚鼠间小距离。

  • 20177-25
    细胞培养实验的基本原理与技术

    细胞培养实验的基本原理与技术细胞培养实验可分为:体外培养、组织培养、细胞培养、器官培养。下面就这4种培养方式做一个简单介绍。体外培养:就是将活体结构成分或活的个体从体内或其寄生体内取出,放在类似于体内生存环境的体外环境中,让其生长和发育的方法。组织培养:是指从生物体内取出活的组织在体外进行培养的方法。细胞培养:是指将活细胞在体外进行培养的方法。器官培养:是指从生物体内取出的器官、器官的一部分或器官原基在体外进行培养的方法。细胞培养实验的基本原理与技术现代生物技术一般认为包括基...

  • 20177-21
    ELISA试剂盒OD值不正常,啥原因?

    Elisa试剂盒是免疫诊断中的一项新技术,现已成功地应用于多种病原微生物所引起的传染病、寄生虫病及非传染病等方面的免疫诊断。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定,根据已经使用的结果,认为ELISA法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点。不仅适用于临床标本的检查,而且由于一天之内可以检查几百甚至上千份标本,因此,也适合于血清流行病学调查。本法不仅可以用来测定抗体,而且也可用于测定体液中的循环抗原,所以也是一种早期诊断的良好方法。因此ELISA法在生物医学...

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